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  • Alumni
  • insegnamento Insegnamento: Biotecnologie animali
  • Crediti: 6
  • Codice: 15597
  • Anno off. Formativa: 2012/2013
  • Corso di laurea: scienze agrarie e ambientali (l-25) (dafne)
  • Sett.Scient.: AGR/18
  • Docente: Loredana  BASIRICO'
Programma
Colture cellulari animali: cenni storici. Il laboratorio di colture cellulari: generalità sul mantenimento di culture cellulari in laboratorio. Descrizione delle principali attrezzature di
un laboratorio di culture cellulari animali: zona di lavoro in condizioni sterili; cappe a flusso laminare ed incubatori. Strumenti e materiale per isolare e crescere culture cellulari. I principali tipi di colture di cellule animali: colture primarie e linee cellulari stabilizzate. Differenze tra colture primarie e linee cellulari. Tecniche di base per colture cellulari immortalizzate in adesione e in sospensione. Tripsinizzazione, conteggio e propagazione di una linea cellulare. Analisi della vitalità cellulare. Lavoro in condizioni di sterilità. Tecniche di disinfezione e sterilizzazione. Materiale e metodi di sterilizzazione. Controllo delle contaminazioni. Eliminazione di contaminazioni microbiche in colture cellulari. Norme di sicurezza nel laboratorio di colture cellulari. Tecniche di conservazione delle cellule: la crioconservazione. Sistemi “in vitro” per test di citotossicità.
Ingegnerizzazione cellulare applicata alla creazione di organismi transgenici. Metodologie di produzione di animali transgenici. Costrutto e sistemi di trasferimento. Impiego di animali transgenici in campo biotecnologico e nella ricerca di base. Vantaggi degli animali geneticamente ingegnerizzati.
Clonazione animale. Una forma più sofisticata di riproduzione assistita per produrre animali più forti e più sani ed ottimizzare il benessere dell’animale e minimizzare l’intervento veterinario. Clonazione per proteggere specie a rischio di estinzione.
Applicazioni pratiche dei marcatori molecolari nelle specie domestiche: controllo sulle malattie e sicurezza alimentare usando il DNA per tracciare la carne animale, incroci e selezioni migliorate, aumento dell’efficienza della produzione animale, identificazione dell’individuo, identificazione del sesso,accertamento della parentela, identificazione di marcatori genetici associati a geni responsabili di patologie. Utilizzo di marcatori SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) per l’identificazione di polimorfismi in geni candidati associabili a caratteri di interesse per la selezione.
Estrazione di DNA da tessuti biologici e matrici complesse (prodotti alimentari per la nutrizione umana e animale); Estrazione RNA da tessuti biologici; Analisi di espressione mediante PCR quantitativa (Real Time PCR); Analisi di espressione genica mediante micro-array. Basi molecolari della tecnologia microarray. Chip a cDNA e chip a oligonucleotidi. Generazione di microarray da banche dati di sequenze con annotazione automatica. Disegno sperimentale con i microarray. Elementi di analisi. Applicazioni diagnostiche.
Nuove tecniche di sequenziamento e loro applicazioni. Piattaforme tecnologiche di sequenziamento ultra-massivo per la diagnostica molecolare in vitro (Illumina Solexa, Affymetrix gene-chip, Roche 454, Applied Biosystems Solid, Helicos). Elementi di analisi dei dati.
miRNA. Modulazione dell’espressione genica mediante miRNA. Utilizzo di sequenze target per miRNA in vettori per la terapia. Esempi di applicazioni terapeutiche

Testi consigliati
- G.L. Mariottini et al. " Introduzione alle colture cellulari", Ed.Tecniche Nuove, 2010.
- James D. Watson, Tania A. Baker, Stephen P. Bell, Alexander Gann, Michael Levine, Richard Losick "Biologia Molecolare del Gene" sesta edizione, Zanichelli.
- Poli G. "Biotecnologie. Conoscere per scegliere", UTET.
Materiale bibliografico fornito dal docente.
Propedeuticità
Genetica
Frequenza
facoltativa
Metodologia didattica
Ore Lezioni: 48
Valutazione del profitto
Prova orale
Descrizione dei metodi di accertamento
Allo studente verranno rivolte alcune domande nell'ambito degli argomenti in cui si articola l'insegnamento
Luogo lezioni
via San Camillo de Lellis snc, Viterbo Blocco aule didattiche come da orario
Orari delle lezioni
come da orario
Orari di ricevimento
Loredana BASIRICO':
Dal Martedì al giovedì 10.00-12.00
Prossime date di Esame

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